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BCA Protein Quantification Kit

BCAProteinQuantificationKit精准、快速的蛋白定量试剂操作简单     高灵敏度兼容性广        线性关系高的标准曲线图1.使用BSA标准蛋白绘制标准曲线 BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCAProteinQuantificationKit),是目前灵敏度最高的蛋白质测定方法之一。在碱性条件下,蛋白质将Cu2+还原为Cu+,Cu+ 与独特的BCAReagentA(含有BC
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Product serial number
E112-01/02
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-
+
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1998
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BCA Protein Quantification Kit

精准、快速的蛋白定量试剂

操作简单          

高灵敏度

兼容性广                

线性关系高的标准曲线

图1.使用BSA标准蛋白绘制标准曲线

BCA 蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Quantification Kit),是目前灵敏度最高的蛋白质测定方法之一。在碱性条件下,蛋白质将Cu2+还原为Cu+,Cu+ 与独特的BCA Reagent A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应,形成紫色的络合物。该水溶性的复合物在A562 nm 处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白质浓度在广泛范围内有良好的线性关系,根据吸光值可以推算出蛋白浓度。因此,使用酶标仪测定其在A562 nm 处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。

常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween-20等不影响检测结果, 但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可使用Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。

组分

E112-01 (250 rxn)

E112-02 (500 rxn)

BSA Standard (1 mg/ml)

2 × 1 ml

4 × 1 ml

BCA Reagent A

50 ml

100 ml

BCA Reagent B

1 ml

2 ×1 ml

BCA Reagent A/B 2-8°C 保存,BSA Standard -30-15°C 保存

We could not find any corresponding parameters, please add them to the properties table

Q1:测出值超出标曲范围怎么办?

A1:将样本稀释后再测,摸索一下最适的稀释浓度。

Q2:BCA使用注意事项。

A2:(1) 需96孔酶标板,酶标仪一台,测定波长为A562 nm最佳。也可以使用分光光度计测定,但测定时,需根据比色皿的最小检测体积,适当 加大BCA工作液的使用量使不小于最小检测体积,样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时, 每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。 

(2) 长期不用时,Reagent A/B可置于2-8℃保存,如发现细菌污染则应丢弃。Reagent A试剂在低温条件下出现结晶沉淀时,可37℃孵育使 其完全溶解, 不影响使用。 

(3) 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景,请使用诺唯赞生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒。 

(4) 进行BSA标准蛋白标准曲线绘制时,使用样品蛋白的溶解液溶解BSA最优。 

(5) BCA试剂对去污剂不敏感,可兼容SDS 3%、Tween-20 5%、EDTA 15 mM、无EGTA、Triton X-100 5%;对还原剂比较敏感,可兼容 DTT 0.5 mM、β-巯基乙醇 0.07%。 

(6) BCA工作液配制过程中吸取Reagent A液和Reagent B液务必更换吸头,工作液新鲜配制后应立即使用,长时间放置会影响检测灵敏度。 

(7) 最好使用塑料比色皿,如使用玻璃比色皿或石英比色皿,使用后立即用少量95%的乙醇清洗。 

(8) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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